血球試劑小編為您介紹下血細(xì)胞分析儀檢測(cè)方法之激光散射和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)。
在白細(xì)胞分類(lèi)上，儀器采用兩個(gè)通道進(jìn)行，一個(gè)為過(guò)氧化酶檢測(cè)通道，另一個(gè)為嗜堿細(xì)胞檢測(cè)通道。
過(guò)氧化酶反應(yīng)（peroxidase，POX）是血涂片染色的一個(gè)常用細(xì)胞化學(xué)染色方法，用于鑒別原始細(xì)胞與成熟的粒細(xì)胞，鑒別粒細(xì)胞與非粒細(xì)胞。染色后的細(xì)胞內(nèi)無(wú)藍(lán)黑色顆粒出現(xiàn)為陰性反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)小顆粒或稀疏樣分布的黑色顆粒為弱陽(yáng)性反應(yīng)，出現(xiàn)黑色粗大而密集的顆粒為強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)。過(guò)氧化物酶主要存在于粒細(xì)胞系和單核細(xì)胞系中，各類(lèi)白細(xì)胞對(duì)過(guò)氧化物酶的反應(yīng)是這樣的：早期的原始粒細(xì)胞為陰性，早幼粒以后的各階段都含有過(guò)氧化物酶，并隨著細(xì)胞的成熟過(guò)氧化酶含量逐漸增強(qiáng)，中性分葉核粒細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，嗜酸性粒細(xì)胞具有最強(qiáng)的過(guò)氧化物酶反應(yīng)，嗜堿粒細(xì)胞不含此酶呈陰性反應(yīng)。在單核細(xì)胞系統(tǒng)，除早期原始階段外，幼稚單核和單核細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)較弱的過(guò)氧化物酶反應(yīng)。淋巴細(xì)胞、幼稚紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞等都為過(guò)氧化物酶陰性反應(yīng)。過(guò)氧化酶檢測(cè)通道就是根據(jù)這個(gè)原理設(shè)計(jì)的，它檢測(cè)每一個(gè)通過(guò)流動(dòng)計(jì)數(shù)池中的白細(xì)胞，經(jīng)過(guò)激光照射所產(chǎn)生的過(guò)氧化酶散射光吸收率，來(lái)當(dāng)然試劑和輔助試劑均進(jìn)行了改良。
1）過(guò)氧化酶最強(qiáng)陽(yáng)性的嗜酸性粒細(xì)胞；
2）過(guò)氧化酶強(qiáng)陽(yáng)性的嗜中性分葉核粒細(xì)胞；
3）體積較大、過(guò)氧化酶弱陽(yáng)性的單核細(xì)胞；
4）體積較小、過(guò)氧化物酶陰性的淋巴細(xì)胞；
5）體積大于淋巴細(xì)胞且過(guò)氧化物酶陰性的未染色大細(xì)胞，此類(lèi)細(xì)胞增加提示幼稚或原始的各類(lèi)細(xì)胞可能出現(xiàn)。
在嗜堿細(xì)胞通道中采用的檢測(cè)原理是：專(zhuān)用的嗜堿細(xì)胞試劑將除了嗜堿細(xì)胞以外的白細(xì)胞除去細(xì)胞膜，使其裸核化并體積變小，僅將嗜堿性粒細(xì)胞保持原有狀態(tài)，體積明顯大于其他類(lèi)的白細(xì)胞。
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